江河站在实验室门口等他们。
陈浩问:「老江,大半夜的,出什麽事了?嫂子呢?」
江河简单回答:「你嫂子在酒店,附一院有紧急情况,我们要连夜做个研究。」
「啊?」程溪瑶一愣,「嫂子来了?」
「这不是重点吧!」易向晚有些紧张道,「原来是紧急情况吗?可是老大,咱都是新手啊?你怎麽不去找附一院检验科的人?」
答案很简单。
检验科的老师们有自己的操作习惯。
如果江河去指挥他们,他们会质疑为什麽不加这个试剂,为什麽要改那个参数。
沟通成本极高。
但这六个人不同。
过去的一段时间里,江河给他们进行了地狱般的RNA提取理论授课。
他们对江河的话言听计从,执行江河的作业程序不会有任何折扣。
所以,江河道:「听好,医院收治了一例极高危的不明原因重症肺炎患者,现在我怀疑是一种新型的重组流感病毒,我们需要在今晚,提取出病毒的RNA,逆转录成A,跑出PCR扩增片段,然後上机测序,拿到它的基因序列证明。」
六个人:「???」
唐培:「老,老大……这什麽未知病毒的,我们做……安全吗?」
「送来的样本是经过硫氰酸胍彻底裂解灭活的,它现在只是一堆核酸物质,没有传染性,这和我们前几天培训的提取外周血游离miRNA的底层逻辑完全一致,甚至因为我们要提取的是病毒的基因组RNA,丰度更高,操作上反而更容易。」
「重点是,防止环境里的RNA酶降解样本。」
江河严肃道:「你们是我亲自教出来的,我对你们的实验规范有绝对的信心,今晚的操作,每一步都必须严格按照我教的规范来,不许有任何多余的动作,听明白了吗?」
「明白!」陆晓林年纪最长,第一个出声回应。
「明白了老江,你说咋干就咋干。」陈浩拍了拍脸,让自己彻底清醒。
「去更衣室,穿两层隔离衣,戴双层乳胶手套,N95口罩,护目镜,进核心区。」
淩晨3:15。
柯正提着一个密封的生物安全转运箱来到了实验室门口。
他把箱子交给江河:「江河,这是马克的深部支气管肺泡灌洗液,已经加了裂解液灭活了。」
「好。」
江河接过箱子,转身刷卡进入实验室核心区,立刻说道:
「第一组,陈浩、向晚,你们负责配制试剂,所有的DEPC水、无水乙醇、异丙醇,全部重新开封新的,确保绝对无RNA酶污染,操作台用RNaseZap喷洒擦拭两遍。」
「第二组,程溪瑶、唐培,你们负责给所有的移液枪换上带滤芯的枪头,准备好离心管和冰盒。」
「师兄,亦舟,你们俩配合我,准备过柱子提取。」
江河站在超净工作台前,将转运箱打开,取出装有灭活样本的冻存管。
「开始。」
实验室内。
严肃,高效。
这群年纪轻轻的学生,此刻展现出了惊人的纪律性。
这就是培训的成果!
江河拿起一把P1000的移液枪,套上带滤芯的枪头。
「加入Trizol试剂,1毫升。」
将样本移入新的离心管中,注入Trizol。
透明的液体瞬间混合。
「室温静置5分钟,让核蛋白复合体彻底解离。」
江河看了一眼墙上的挂锺。
五分钟一到。
「加氯仿,0.2毫升。」
「盖紧管盖,剧烈振荡15秒。」
「静置3分钟。」
顾亦舟在一旁已经打开了高速冷冻离心机的盖子,温度已经预冷到了4℃。
「放入离心机,配平,12000转,15分钟。」
这15分钟极其漫长。
「滴——」
离心机停止。
江河小心翼翼取出离心管。
在冷光的照射下,管内的液体清晰地分成了三层:
底层是红色的酚氯仿相,中间是一层薄薄的白色蛋白交界面,最上层是无色的水相。
所有的病毒RNA,都溶解在这最上层的无色水相中。
江河深吸了一口气,换了一把P200的移液枪。
这一步是整个提取过程中最关键的一步。
如果吸到了中间的蛋白层或者底层的有机相,整个样本就废了。
他将手肘支撑在台面上,按下移液枪的按钮。
枪尖精准悬停在无色水相的中央,缓缓吸取了400微升的液体,移入一个全新的无酶离心管中。
全程,江河的手没有一丝颤抖。